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                  現(xiàn)貨人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白的說明書

                  發(fā)布時間: 2012/11/14  點(diǎn)擊次數(shù): 509次
                  提 供 商: 研域(上海)化學(xué)試劑有限公司 資料大小:
                  圖片類型: 下載次數(shù): 89
                  資料類型: JPG 瀏覽次數(shù): 509
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                  人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白

                  用 途:
                      人IGFBP-1 ELISA試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、緩沖液中細(xì)胞上清液及各種體液中的IGFBP-1 。本試劑盒可以檢測天然和重組的IGFBP-1 。本試劑盒于科研、而非用于臨床診斷。
                      
                  試驗(yàn)原理:
                      人IGFBP-1 試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知IGFBP-1 濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將IGFBP-1 和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中IGFBP-1 的濃度呈比例關(guān)系。

                  自備材料
                  蒸餾水。
                  加樣器:5ul、10 ul、50 ul、100 ul、200、500 u、1000lul。
                  振蕩器及磁力攪拌器等。

                  人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白

                  安全性

                  避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
                  實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
                  不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。


                  操作注意事項(xiàng)
                  試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
                  實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
                  不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
                  使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
                  使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
                  洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
                  底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
                  加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
                  按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

                  人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白

                  樣品收集、處理及保存方法
                  血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
                  血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
                  細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
                  保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

                  人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白

                  操作步驟
                  使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
                  根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
                  加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
                  甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
                  每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
                  甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
                  每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
                  取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
                  在450nm波長處測定各孔的OD值。

                  人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白

                  結(jié)果分析
                  以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的IGFBP-1 標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的IGFBP-1 含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。

                  局限
                  6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到的結(jié)果。

                  試劑盒性能
                  靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
                  特異性:不與人其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
                  重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

                  E.coli O139(Escherichia coli O139) 抗志賀毒素大腸桿菌O139抗體(仔豬水腫病志賀毒素大腸桿菌O139) 0.2ml
                  E.coli O139(Escherichia coli O139) 抗志賀毒素大腸桿菌O139抗體(仔豬水腫病志賀毒素大腸桿菌O139) 1.0ml
                  EP3(Prostaglandin E receptor 3) 前列腺素E受體3抗體 0.2ml
                  EphA1 R(Ephrin A1 Receptor) 抗EphA1-R受體抗體 0.2ml
                  EphA2 R(Ephrin A2 Receptor) 兔抗酪氨酸蛋白激酶A2受體抗體 0.1ml
                  Phospho-EGFR(Tyr1086)  磷酸化表皮生長因子受體抗體 0.1ml
                  EphA4(Eph-related receptor tyrosine kinase ligand 7) 抗酪氨酸蛋白激酶A5抗體 0.2ml
                  EphA2 R(Ephrin A2 Receptor) 兔抗酪氨酸蛋白激酶A2受體抗體 0.2ml
                  EphA4 R(Ephrin A4 Receptor 酪氨酸蛋白激酶A4受體抗體 0.2ml
                  EphB2 R/Eph receptor B2 (Ephrin type B receptor 2) Eph receptor B2 抗體 0.1ml
                  EphB2 R/Eph receptor B2 (Ephrin type B receptor 2) Eph receptor B2 抗體 0.2ml
                  Phospho-Estrogen Receptor alpha (Tyr537)  磷酸化雌激素受體α抗體 0.1ml
                  EPOR 紅細(xì)胞生成素受體抗體 0.1ml
                   

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