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                  ELISA試劑盒樣本處理我們是這樣做的

                  發(fā)布時間: 2015-07-22  點擊次數(shù): 876次

                      ELISA試劑盒樣本前處理是酶聯(lián)免疫試驗中關(guān)鍵的一步,稍有不慎將導(dǎo)致實驗滿盤皆輸,如何安全,快捷的處理樣本,我們公司是這樣做的。
                  1 均質(zhì)
                  組織樣本:肉、肝食品類切細(xì),用絞肉機(jī)反復(fù)絞碎,混合均勻。
                  水產(chǎn)樣本:去除樣品的非食用部分,食用部分切細(xì),用均質(zhì)器均漿;原料表面較臟時,需適當(dāng)用蒸餾水清洗。
                  蛋類:鮮蛋去殼,蛋黃和蛋白充分混勻。
                  水果、蔬菜類:先用水洗去泥沙,然后除去表面的水分,取食用部分。
                  2 振蕩提取
                  將提取溶劑加入到裝有樣品的具塞容器中,振蕩,ELISA試劑盒使提取溶劑與容器內(nèi)的樣品充分接觸以深入到樣本組織內(nèi)部,提取待測組分。
                  2.1振蕩方式:振蕩器上進(jìn)行上下、往返式振蕩、手搖式上下振蕩。
                  2.2 在組織樣本中加入有機(jī)溶劑之間提取時,應(yīng)邊加邊振蕩,防止組織凝結(jié)成團(tuán),不利于提取。
                  3. 在用有機(jī)溶劑提取過程中,如果出現(xiàn)乳化現(xiàn)象,解決的方法有:①用細(xì)頭輕輕的攪拌,破壞乳化后,再重復(fù)離心。②再加入適量的提取劑,重新振蕩。注意離心后要保證樣本的稀釋倍數(shù)不變。
                  4 濃縮
                  由于凈化過程中引入的溶劑,可能會降低待測組分的濃度或者不適宜直接分析,需要去除全部有機(jī)溶劑。即試劑盒前處理步驟中把樣本在60℃氮氣下吹干,再用復(fù)溶液溶解干燥殘留物。
                  濃縮方式:
                  氮氣吹干除雜、壓縮空氣吹干除雜。
                  注意:
                  1在吹干樣本之前,用甲醇清洗針頭,防止雜質(zhì)干擾。
                  2在吹樣本時,針頭應(yīng)在液面上空,避免與樣本接觸,防止產(chǎn)生交叉污染。
                  3樣本吹干后應(yīng)立即取下,避免吹的時間過長,影響zui終檢測結(jié)果。
                  4不同的藥物,吹干后樣本的保質(zhì)期不同,提倡待樣本回到室溫后立即復(fù)溶。
                  5 凈化
                  經(jīng)過提取的待測組分中通常含有一些會干擾試劑盒中抗原抗體反應(yīng)的雜質(zhì)或者是含有與待測物結(jié)構(gòu)相似的雜質(zhì)。將待測組分與雜質(zhì)分離的過程,我們稱為試劑盒中樣本的凈化。ELISA試劑盒在我們現(xiàn)有的試劑盒前處理方法中涉及到的zui常見的凈化是:液液分配法。

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